3、脱糖响应面法优化PA分离工艺

（1）响应面设计

根据单因素实验，大豆的分提取时间达到70min后，粉末PA的磷脂离含量和回收率都趋于平衡，故在设定提取时间为70min、中磷脂酸提取1次、脱糖沉淀pH=8的大豆的分前提下，根据Box-Behnken中心组合设计原理，粉末将提取温度(A)、磷脂离料液比(B)和酸醇比(C)作为自变量，中磷脂酸作三因素三水平响应面分析，脱糖因素水平见表1，大豆的分响应面实验设计及结果见表2。粉末

由表2得二次多项回归方程：

R=73.69+3.55A+3.22B+4.69C+1.32AB-0.71AC-0.78BC-5.44A²-2.10B²+2.99C²，磷脂离其中R为PA纯度，中磷脂酸A为温度，B为料液比，C为酸醇比。对二次多项回归方程进行方差分析和显著性检验，结果见表3。

该模型能解释99.53％响应者的变化，即该模型与实际实验拟合良好，实验误差小。失拟项为0.1766，是不显著的。这说明此模型完全可以用来预测PA的含量。校正决定系数为R²_Adj=0.9893，说明该回归方程能够较好地描述各因素与响应值之间的真实关系。信噪比为45.099，说明二次模型的模拟具有较高可信度，可用此模型对设定条件下的PA含量进行预测。由F值检验可知各因素贡献与为C＞A＞B，即乙醇酸浓度>温度>料液比。

(2)验证试验

按照优化后的条件结合实际情况，得到PA最佳提取温度42℃，料液比1:37，酸醇比V_25％Hcl:V_无水乙醇=1.2:100，提取时间70min，提取1次。经3次平行试验，PA的含量均值为80.96％，得率为70.53％，其中PA含量与预测值(82.70％)相差1.74个百分点。

三、结论

使用脱糖粉末大豆磷脂为原料，采用响应面法优化酸性乙醇分离PA工艺，得到最佳工艺条件为：提取温度42℃，料液比1:37，酸醇比V_25％HcI:V_无水乙醇=1.2:100，提取时间70min，提取次数1次，于pH=5时分离杂质，再于pH=8时沉淀PA，此时产品含量为80.96％，回收率为70.53％。

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